遺傳基因擴(kuò)增試驗(yàn)又被稱為PCR試驗(yàn)，其特性是能將少量的DNA大幅度提升，PCR是生物學(xué)科學(xué)研究和試驗(yàn)的基本方式，廣泛運(yùn)用于分子生物學(xué)各行各業(yè)，比如：艾滋病檢測(cè)、乙肝、禽病疫、癌基因的檢驗(yàn)和確診，DNA指紋識(shí)別、個(gè)人鑒別、dna鑒定及法醫(yī)物證，動(dòng)、植物檢疫，小動(dòng)物以及衍生品檢驗(yàn)，寵物飼料、護(hù)膚品、食品衛(wèi)生安全檢驗(yàn)，轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因水稻微生物檢驗(yàn)等。

  一、PCR實(shí)驗(yàn)室合理布局

  PCR實(shí)驗(yàn)室正常情況下為試劑提前準(zhǔn)備區(qū)、試品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增物質(zhì)剖析區(qū)四個(gè)獨(dú)立的工作中區(qū)域并設(shè)立專用型過(guò)道，各工作中區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間，工作區(qū)域與緩沖間宜安裝連鎖加盟設(shè)備。不一樣作用的工作區(qū)域應(yīng)是隔開(kāi)單獨(dú)的，各工作區(qū)域有顯著的標(biāo)示，不可以直達(dá)，假如緊密相連，需安裝物件不銹鋼傳遞窗。前兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，擴(kuò)增后區(qū)與擴(kuò)增前區(qū)應(yīng)嚴(yán)苛分離。試驗(yàn)原材料、試劑、記錄紙、筆、清理原材料等，只有從擴(kuò)增后區(qū)流入擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑提前準(zhǔn)備區(qū)→試品制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增物質(zhì)剖析區(qū)，不可反向流動(dòng)性。實(shí)驗(yàn)室的氣旋也需從擴(kuò)增后區(qū)流入擴(kuò)增后區(qū)，不可反向流動(dòng)性。各工作區(qū)域頂端應(yīng)安裝紫外線殺菌燈，紫外線殺菌燈的光波長(zhǎng)為254nm，每20㎡一支40W的紫外線殺菌燈。

  二、實(shí)驗(yàn)室各個(gè)區(qū)作用及關(guān)鍵機(jī)器設(shè)備

  1、試劑提前準(zhǔn)備區(qū)：關(guān)鍵開(kāi)展試劑的制備、散裝和主反映溶液的制備。試劑和用以試品制做的原材料應(yīng)立即運(yùn)輸至該區(qū)域，不可歷經(jīng)其他區(qū)域。試劑原料務(wù)必存儲(chǔ)在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)關(guān)鍵機(jī)器設(shè)備有天平秤、電冰箱、離心脫水機(jī)、加樣器、震蕩器等。

  針對(duì)氣旋工作壓力的操縱，本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)苛的規(guī)定。

  2、試品制備區(qū)：關(guān)鍵開(kāi)展試品的儲(chǔ)存、核苷酸(RNA、DNA)獲取、存儲(chǔ)以及添加至擴(kuò)增反映管和測(cè)量DNA的生成。本區(qū)關(guān)鍵機(jī)器設(shè)備有電冰箱、超凈工作臺(tái)、離心脫水機(jī)、加樣器、震蕩器、恒溫水浴槽等。

  本區(qū)的滲透壓力規(guī)定為：相對(duì)性于相鄰區(qū)域?yàn)檎龎毫?，以防止從相鄰區(qū)進(jìn)到本區(qū)的氣溶膠污染。

  3、擴(kuò)增區(qū)：關(guān)鍵開(kāi)展DNA擴(kuò)增。除此之外，已制備的DNA模版 (來(lái)源于試品制備區(qū))的添加和主反映溶液(來(lái)源于試劑提前準(zhǔn)備區(qū))制備成反映溶液等也可在本區(qū)內(nèi)開(kāi)展。本區(qū)關(guān)鍵機(jī)器設(shè)備有：擴(kuò)增儀、電冰箱、離心脫水機(jī)、加樣器等。

  本區(qū)的滲透壓力規(guī)定為：相對(duì)性于相鄰區(qū)域?yàn)樨?fù)壓力，以防止大氣氣溶膠從本區(qū)露出。

  4、擴(kuò)增物質(zhì)剖析區(qū)：擴(kuò)增物質(zhì)的測(cè)量。本區(qū)關(guān)鍵機(jī)器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗全自動(dòng)切管機(jī)、加樣器和水浴箱等。

  本區(qū)的滲透壓力的規(guī)定為：相對(duì)性于相鄰區(qū)域?yàn)樨?fù)壓力，以防止擴(kuò)增物質(zhì)從本區(qū)外擴(kuò)散至其他區(qū)域。

  三、PCR實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)系統(tǒng)及工作壓力操縱

  各區(qū)域中間應(yīng)具有單邊的試驗(yàn)加工工藝流、貨運(yùn)物流、人工流產(chǎn)與氣旋，產(chǎn)生單邊步驟的維護(hù)天然屏障，防止試驗(yàn)中間的互相影響，避免 大氣氣溶膠外擴(kuò)散對(duì)試驗(yàn)全過(guò)程導(dǎo)致環(huán)境污染。

  PCR實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)苛的潔凈規(guī)定，可是為防止每個(gè)試驗(yàn)區(qū)域交叉式環(huán)境污染的概率，宜選用全送全排的自然通風(fēng)方式，嚴(yán)控送、排風(fēng)系統(tǒng)的占比以確保各試驗(yàn)區(qū)的工作壓力規(guī)定。

  四、PCR實(shí)驗(yàn)室裝飾設(shè)計(jì)

  實(shí)驗(yàn)室排架結(jié)構(gòu)應(yīng)堅(jiān)固、密封性好；全部陽(yáng)角線宜選用弧形銜接；墻面內(nèi)腔光滑、不積塵、抗腐蝕、容易清洗消毒殺菌；路面應(yīng)用PVC卷材或環(huán)氧樹(shù)脂膠自流坪，原材料應(yīng)考慮無(wú)間隙、沒(méi)有滲漏、光滑、抗腐蝕的規(guī)定。

  五、PCR實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)問(wèn)題

  1、好多個(gè)區(qū)域的尺寸設(shè)定狀況，試劑提前準(zhǔn)備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增物質(zhì)剖析區(qū)，室內(nèi)空間能夠相對(duì)性小一些，試品制備區(qū)域置放超凈工作臺(tái)和低溫箱，室內(nèi)空間應(yīng)大一些。

  2、試劑提前準(zhǔn)備區(qū)、試品制備區(qū)設(shè)應(yīng)急立式洗眼器，以確保實(shí)際操作工作人員的安全性。

  3、PCR實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有嚴(yán)苛的潔凈規(guī)定，能夠依據(jù)客戶的應(yīng)用狀況和資產(chǎn)的資金投入挑選。

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