無菌檢測潔凈室浮游菌檢驗及常見問題

建立無菌室浮游菌檢測限度操作流程，標(biāo)準(zhǔn)無菌室浮游菌的檢驗。

2局限性

適用無菌室（包含清潔事兒臺）浮游菌的測驗和自然環(huán)境認(rèn)證。

3崗位職責(zé)

QA、QC員工閱簽。

4內(nèi)容

4.1參照限度：GB/T16293-2010

4.2檢測方法

本檢測方法為記數(shù)濃度值法，即根據(jù)互聯(lián)網(wǎng)飄浮在空氣中的潛在性顆粒于專業(yè)的培養(yǎng)基（挑選能印證其可以適用微生物菌種生長發(fā)育的培養(yǎng)基），經(jīng)多個時間和適宜的生長發(fā)育標(biāo)準(zhǔn)讓其滋長到可以看到的菌落計數(shù)，以分辨該無菌室的細(xì)菌濃度值。

4.3測試設(shè)備、防具和培養(yǎng)基

浮游菌采樣器、培養(yǎng)皿（采用與儀器設(shè)備相切合的培養(yǎng)皿）、培育基、控溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器。

4.4測試狀態(tài)及檢測時間

4.4.1靜態(tài)數(shù)據(jù)和信息二種情況均可舉辦檢測，靜態(tài)數(shù)據(jù)檢測時，房間內(nèi)檢測員工不可超過2人。

4.4.2在靜態(tài)數(shù)據(jù)a檢測時，單邊流無菌潔凈車間（區(qū)），檢測在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件正常的運轉(zhuǎn)時間不少于10分鐘后最開始；非單方面流無菌室（區(qū)），檢測在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件正常的運作不少于30分鐘后最開始。在靜態(tài)數(shù)據(jù)b檢測時，單邊流無菌室（區(qū)），檢測在生產(chǎn)加工實際操作員工撤出當(dāng)場并經(jīng)過10分鐘臭氧消毒后最開始；非單方面流無菌室（區(qū)），檢測在生產(chǎn)加工實際操作員工撤出當(dāng)場并經(jīng)過20分鐘臭氧消毒后最開始。

4.5取樣點真是定

4.5.1至少取樣點數(shù)量見表1，每一次最少取樣量見表2。

表1至少取樣點數(shù)量

注：針對A級單邊流無菌室（區(qū)），包含A級清潔事兒臺，總面積指的是正壓送風(fēng)口外總面積；針對D級以上的非單方面流無菌室（區(qū)），總面積指的是屋子總面積。

表2最少取樣量

4.5.2取樣點部位布署宜爭取均值，阻攔取樣點在部分地區(qū)過度希罕，取樣點依據(jù)《潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控治理規(guī)程》配件×××生產(chǎn)車間潔凈度檢測取樣點框架圖的規(guī)定布署，每一個取樣點一樣平時取樣一次。

4.5.3事兒區(qū)取樣點部位距地0.8m~1.5m上下（稍高于事人情世故），正壓送風(fēng)口測量點部位擺脫排風(fēng)面30cm上下，可在重要武器裝備或重要事兒流動性局限性處增加測量點。

4.6無塵車間檢測提前準(zhǔn)備

4.6.1采樣器在進到被測地區(qū)前先清潔外邊，隨后用75%醫(yī)用酒精消毒一遍或儲存于被測地區(qū)內(nèi)，與被檢測地區(qū)一起消毒殺菌（用以A級無菌室的采樣器務(wù)必事先放到被測屋子里）。

4.6.2A/B級區(qū)接受一次性培養(yǎng)皿，其他地區(qū)按無菌技術(shù)規(guī)定，在質(zhì)環(huán)室清潔事兒臺子上提早制取培養(yǎng)預(yù)留（將殺菌后的培養(yǎng)基用沙浴消溶，制冷至約50-60℃，Φ90mm培養(yǎng)皿每一個竭盡約20ml培養(yǎng)基，Φ150mm培每一個竭盡約30ml培養(yǎng)基），培育皿加蓋后在室內(nèi)溫度下發(fā)至凝結(jié)。自做好的培養(yǎng)皿在無菌室內(nèi)儲放不超越48鐘頭，2~8℃保存的培養(yǎng)皿一樣平時不超越1周，一次性培養(yǎng)皿在標(biāo)明的有效期限內(nèi)應(yīng)用，落伍不可應(yīng)用。

4.6.3A/B級區(qū)采用的培養(yǎng)皿在地區(qū)消毒殺菌前一次性傳到，隨自然環(huán)境一起消毒殺菌，在消毒劑拿取間鐵架子上儲存，在有效期限內(nèi)應(yīng)用。如要姑且傳到，則務(wù)必在前一天臭氧殺菌前根據(jù)C級與B級傳達窗傳到B級區(qū)舉辦臭氧殺菌，第二天應(yīng)用。傳到前外邊也務(wù)必用75%酒精擦拭。其他地區(qū)用培養(yǎng)皿按物件傳到規(guī)定當(dāng)日傳到應(yīng)用。

4.6.4取樣前，首先用75%乙醇清洗采樣器的機蓋、輪盤及其外罩的內(nèi)外邊（FKC型蜉蝣氣體塵菌采樣器用乙醇清洗取樣頭）。

4.6.5檢測詳盡實際操作見“JYQ-Ⅱ型浮游菌采樣器限度操作流程或FKC-1型蜉蝣氣體塵菌采樣器限度操作流程”。

4.6.6取樣竣事后，蓋緊培養(yǎng)皿外蓋，在培養(yǎng)皿上標(biāo)明全部信息內(nèi)容（包含物質(zhì)生產(chǎn)批號，置放部位等），將培養(yǎng)皿用適宜的方法綁扎，倒放置30~35℃控溫培養(yǎng)箱中培育，培養(yǎng)時間不少于2天。

4.6.7培養(yǎng)竣事后逐一查驗培養(yǎng)皿，用眼睛對培養(yǎng)皿上任何的菌體立即記數(shù)、標(biāo)記，隨后用5~10倍高倍放大鏡查驗，有無忽略。若培養(yǎng)皿上面有2個或2個以上的菌體重合，可辨別時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。

4.7檢測記錄應(yīng)包含以下幾點

4.7.1被檢測地區(qū)名字、檢測日期、測試根據(jù)、被試者名字、測試設(shè)備及檢測方法的外貌，檢測時需接受的情況和房間內(nèi)檢測員工數(shù)，取樣點數(shù)量，檢測頻次、取樣總流量，檢測實際效果（包含全部統(tǒng)計分析籌算材料）等。

4.7.2若為動態(tài)性檢測，還應(yīng)記錄當(dāng)場實際操作員工數(shù)量，當(dāng)場武器裝備運行情況等。

4.8實際效果籌算

4.8.1用記數(shù)方法得到每個培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。

4.8.2每一個測量點的浮游菌均值濃度值籌算按住式舉辦

4.9實際效果鑒定

4.9.1每一個測量點的浮游菌均值濃度值務(wù)必小于所選中鑒定限度中的界限。

4.9.2在靜態(tài)數(shù)據(jù)檢測時，若某測量點的浮游菌均值菌濃度值超越鑒定限度，則應(yīng)再次取樣2次，兩次檢測實際效果均及格才氣判為相符合。

4.9.3若有超越劃分者，務(wù)必即時與生產(chǎn)制造單位聯(lián)絡(luò)，對該地區(qū)舉辦消毒殺菌或其他處理，隨后再次檢測至及格。

4.10一樣平時監(jiān)管

4.10.1浮游菌一樣平時監(jiān)管設(shè)糾偏裝置程度和警示程度（限度局限性及抽樣次數(shù)見《潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控治理規(guī)程》），以確保無菌室（區(qū)）的細(xì)菌濃度值遭受操縱，按時檢驗以查驗微生物菌種負(fù)載及其消毒液的法律效力，并且做好趨向分析。靜態(tài)數(shù)據(jù)和信息的監(jiān)管都能夠接受該方法。

4.10.2針對浮游菌的抽樣次數(shù)，若是涌起以下情況應(yīng)考慮改動，在評定下列情況后，也應(yīng)明確別的項目的檢驗次數(shù)

――持續(xù)超越糾偏裝置程度和警示程度；

――歇工時間比預(yù)估拓寬；

――重要地區(qū)內(nèi)發(fā)覺有環(huán)境污染存有；

――在生產(chǎn)制造時期，空氣凈化設(shè)備舉辦一切重要的檢修；

――一樣平時實際操作記錄體現(xiàn)出共性的數(shù)據(jù)信息；

――消毒殺菌技術(shù)規(guī)范的更改；

――造成生物入侵的安全事故等；

――當(dāng)生產(chǎn)制造武器裝備有重要檢修或增加武器裝備時；

――當(dāng)無菌室（區(qū)）構(gòu)造或地區(qū)漫衍有重要變更時。

4.11重視事宜

4.11.1JYQ-Ⅱ型浮游菌采樣器經(jīng)消毒殺菌后先不放進培養(yǎng)皿，打開浮游菌采樣器，使儀器設(shè)備中的殘留消毒液揮發(fā)，時間不少于5分鐘，查驗總流量并憑據(jù)取樣量調(diào)節(jié)設(shè)置取樣時間。

4.11.2單邊流無菌室（區(qū)）或正壓送風(fēng)口，采樣器取樣口房屋朝向應(yīng)正對著氣旋偏重，非單方面流無菌室（區(qū)），取樣口往上。

4.11.3檢測時需要穿著與被測地區(qū)潔凈度等級規(guī)定相切合并經(jīng)高壓滅菌后的潔凈服。

4.11.4布署取樣點時，最少應(yīng)只要繞開細(xì)顆粒物較密集的回風(fēng)管道。

4.11.5取樣竣事，要用75%酒精噴射采樣器外罩的內(nèi)部和輪盤（FKC型蜉蝣氣體塵菌采樣器噴出取樣頭和愛惜蓋）。

4.11.6應(yīng)接受一切對策避免取樣過程的環(huán)境污染和其它很有可能對樣版的環(huán)境污染。

4.11.7每次培養(yǎng)基應(yīng)該有對比實驗，磨煉培養(yǎng)基自身是不是環(huán)境污染，可每次選中3只培養(yǎng)皿做為對比培養(yǎng)；培育皿在用以檢驗時，為阻攔培養(yǎng)皿運送或挪動過程導(dǎo)致的危害，宜與此同時舉辦對比實驗，每一次或各個地區(qū)取1個對比皿，與取樣皿同法實際操作但不需外露取樣，隨后與采集后的培養(yǎng)皿一起放進培養(yǎng)箱中培育，實際效果應(yīng)無菌檢測落生長發(fā)育。

4.11.8取樣前要認(rèn)真仔細(xì)每一個培養(yǎng)皿的品質(zhì)，如發(fā)覺質(zhì)變、損壞或環(huán)境污染的應(yīng)去除。

4.11.9因為病菌品種繁多，差別甚大，記數(shù)時一樣平時用電子散射光于培養(yǎng)皿后面或正臉細(xì)心調(diào)查，不必漏計培養(yǎng)皿邊沿生長發(fā)育的菌體，并須重視細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀的差別，必須時要高倍顯微鏡辨別。

4.11.10務(wù)必按時對控溫培養(yǎng)箱舉辦校檢。